Differenza principale: centrifugazione preparativa e analitica

La centrifugazione è un metodo di separazione in cui l'applicazione della forza centrifuga sedimenta o fraziona una miscela eterogenea. La microcentrifugazione, la centrifugazione ad alta velocità e l'ultracentrifugazione sono i tre tipi di centrifugazione in base al volume e alla velocità utilizzati nel processo. Tra gli altri metodi di centrifugazione, l'ultracentrifugazione utilizza la massima velocità angolare. La velocità di rotazione dell'ultracentrifugazione raggiunge i 1.000.000 g. Pertanto, l'ultracentrifugazione viene utilizzata per isolare piccole particelle come ribosomi, proteine ​​e virus. La centrifugazione preparativa e analitica sono i due tipi di metodi di ultracentrifugazione. Il differenza principale tra centrifugazione preparativa e analitica è che la centrifugazione preparativa viene utilizzata nella pellettatura di piccoli materiali come membrane, organelli, virus, DNA e RNA mentre la centrifugazione analitica viene utilizzata per determinare la massa e la forma delle macromolecole come i complessi proteici e la velocità di sedimentazione delle molecole.

Aree chiave coperte

1. Che cos'è la centrifugazione preparativa - Definizione, fatti, usi 2. Che cos'è la centrifugazione analitica - Definizione, fatti, usi 3. Quali sono le somiglianze tra centrifugazione preparativa e analitica – Cenni sulle caratteristiche comuni 4. Qual è la differenza tra centrifugazione preparativa e analitica – Confronto delle differenze chiave

Termini chiave: centrifugazione analitica, processi analitici, centrifugazione a gradiente di densità, centrifuga ad alta velocità, centrifugazione preparativa, piccole particelle

Cos'è la centrifugazione preparativa

La centrifugazione preparativa si riferisce a una centrifuga ad alta velocità utilizzata nella separazione di piccole particelle submicroscopiche. Separa piccole particelle come virus, particelle virali, complessi proteici, proteine, lipoproteine, RNA e DNA plasmidico. Viene mostrata una centrifuga preparativa Beckman-Coulter con il suo rotore all'interno Figura 1.

Figura 1: Centrifuga preparativa Beckman-Coulter

La centrifugazione preparativa può essere utilizzata anche come a metodo di centrifugazione in gradiente di densità. Il gradiente di saccarosio può essere utilizzato per separare gli organelli cellulari. Il gradiente di cesio può essere utilizzato per separare gli acidi nucleici.

Cos'è la centrifugazione analitica

La centrifugazione analitica si riferisce a una centrifuga ad alta velocità utilizzata nei processi analitici. Viene utilizzato per ottenere informazioni sui tipi di molecole in un particolare campione conoscendo la forma complessiva, i cambiamenti conformazionali e la stechiometria delle subunità. Può anche essere usato per determinare la velocità di sedimentazione delle particelle. Viene mostrata un'ultracentrifuga Figura 2.

Figura 2: Ultracentrifuga Beckman Coulter Optima LE-80K

Un sistema di rilevamento ottico è fornito con la centrifuga analitica per monitorare la rotazione del campione in tempo reale. Gli esperimenti sulla velocità di sedimentazione e gli esperimenti sull'equilibrio di sedimentazione sono i due principali tipi di esperimenti eseguiti con la centrifugazione analitica.

Somiglianze tra centrifugazione preparativa e analitica

Differenza tra centrifugazione preparativa e analitica

Definizione

Centrifugazione preparativa: La centrifugazione preparativa si riferisce a una centrifuga ad alta velocità utilizzata nella separazione di piccole particelle submicroscopiche.

Centrifugazione analitica: La centrifugazione analitica si riferisce a una centrifuga ad alta velocità utilizzata nei processi analitici.

Procedure analitiche

Centrifugazione preparativa: La centrifugazione preparativa non può essere utilizzata nelle procedure analitiche.

Centrifugazione analitica: La centrifugazione analitica viene utilizzata nelle procedure analitiche.

Tipo di campioni

Centrifugazione preparativa: La centrifugazione preparativa viene utilizzata nella pellettatura di piccoli materiali come membrane, organelli, virus, DNA plasmidico e RNA.

Centrifugazione analitica: La centrifugazione analitica viene utilizzata per determinare la massa e la forma delle macromolecole come i complessi proteici e la velocità di sedimentazione delle molecole.

Volume del campione

Centrifugazione preparativa: Un campione di grandi dimensioni può essere processato nella centrifugazione preparativa.

Centrifugazione analitica: Solo piccoli volumi di campione (meno di 1 mL) possono essere processati mediante centrifugazione analitica.

Purezza del campione

Centrifugazione preparativa: Campioni meno puri possono essere utilizzati nella centrifugazione preparativa.

Centrifugazione analitica: Nella centrifugazione analitica vengono utilizzati campioni relativamente puri.

Coefficiente di sedimentazione e peso molecolare

Centrifugazione preparativa: La centrifugazione preparativa può essere utilizzata per determinare il coefficiente di sedimentazione e il peso molecolare.

Centrifugazione analitica: Nella centrifugazione analitica vengono utilizzati un preciso coefficiente di sedimentazione e un peso molecolare.

Lettura ottica

Centrifugazione preparativa: Le frazioni possono essere raccolte dopo la corsa in centrifugazione preparativa e non vi è alcuna lettura ottica durante la corsa.

Centrifugazione analitica: L'andamento della centrifugazione analitica può essere osservato visivamente durante la centrifugazione analitica.

Disposizioni di raffreddamento

Centrifugazione preparativa: Nella centrifugazione preparativa non vengono utilizzati dispositivi di raffreddamento.

Centrifugazione analitica: Poiché l'alta velocità genera più calore, nella centrifugazione analitica dovrebbe essere utilizzata una disposizione di raffreddamento

Tipo di macchine

Centrifugazione preparativa: L5-65 e L5-75 sono utilizzati nella centrifugazione preparativa.

Centrifugazione analitica: Beckman Modello E viene utilizzato nella centrifugazione analitica.

Conclusione

La centrifugazione preparativa e analitica sono i due tipi di metodi di ultracentrifugazione che utilizzano la centrifugazione ad alta velocità. La centrifugazione preparativa viene utilizzata per separare piccole particelle come ribosomi, DNA plasmidico e RNA. Tuttavia, la centrifugazione analitica viene utilizzata principalmente per ottenere misurazioni analitiche del campione. La principale differenza tra centrifugazione preparativa e analitica è lo scopo di ciascun tipo di centrifugazione durante l'elaborazione del campione.

Riferimento:

1. Aswathi KS, Studente presso l'università centrale del Kerala Follow. "Ultracentrifugazione". LinkedIn SlideShare, 17 novembre 2015, disponibile qui.

Cortesia dell'immagine:

1. "Centrifuga preparativa Beckman-Coulter Avanti J25-03" Per nome reale: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Opera propria (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia 2. "Ultracentrifuge" di Mlw3559 su Wikibooks inglese (CC BY-SA 2.5) tramite Commons Wikimedia