Diversi coloranti vengono utilizzati nella colorazione di diversi materiali biologici. Le macchie reagiscono con una sostanza specifica in un campione biologico, dando un colore specifico a quella sostanza. L'acetocarmine è un colorante utilizzato per la dimostrazione degli acidi nucleici all'interno del cromosoma. Ci sono anche altri motivi che rendono l'acetocarmine più adatto come colorante per acidi nucleici. Sono discussi in questo articolo.

Aree chiave coperte

1. Cos'è una macchia? - Definizione, tipi di macchie 2. Cos'è l'acetocarmine? - Definizione, caratteristiche, preparazione 3. Perché l'acetocarmine viene utilizzato negli studi sui cromosomi mitotici – Preparazione, Uso di Acetocarmine

Termini chiave: acetocarmine, cromosomi, formaldeide, idrolisi, studi sul cromosoma mitotico, macchie

Cos'è la colorazione?

La colorazione è una tecnica utilizzata negli studi microscopici di campioni biologici per migliorare il contrasto del campione biologico al microscopio. Evidenzia le strutture del tessuto biologico come popolazioni cellulari specifiche, organelli, DNA, proteine, carboidrati e lipidi. La macchia può essere costituita da sostanze chimiche sintetiche o da sostanze chimiche naturali originate da piante o animali. I metodi di colorazione sono descritti di seguito.

1. Colorazione singola – Nella colorazione singola, viene utilizzata una sola colorazione per dare un unico colore all'intero campione biologico.
2. Doppia colorazione – Nella doppia colorazione, vengono utilizzati due coloranti per colorare organelli specifici o un'area specifica.
3. Colorazione multipla – Nella colorazione multipla, vengono utilizzati più di due coloranti per la colorazione specifica di componenti come gli organelli nel campione.

Cos'è l'acetocarmine?

Il carminio è un colorante di base preparato da un insetto noto come Coccus cacti. L'acetocarmine viene prodotto mescolando il carminio con l'acido acetico glaciale. È una colorazione specifica del DNA utilizzata per la visualizzazione dei cromosomi superavvolti durante le diverse fasi della mitosi.

Preparazione della colorazione con acetocarmine

1. Sciogliere 10 g di carminio in 1 L di acido acetico glaciale al 45%.
2. Aggiungere i granuli di alluminio e riflusso per 24 h.
3. Filtrare in bottiglie scure e conservare a 4°C.
4. La colorazione può essere intensificata aggiungendo cloruro ferrico (aggiungere 5 mL di una soluzione di cloruro ferrico al 10% per 100 mL di % acetocarmine).

Perché la colorazione di acetocarmine viene utilizzata negli studi sui cromosomi mitotici?

Generalmente, l'acetocarmine è un colorante utilizzato nella colorazione singola. Colora sia il nucleo che il citoplasma. Per colorare i cromosomi mantenendo il citoplasma incolore, il campione biologico deve essere prima trattato con formaldeide, quindi può essere idrolizzato con HCl a 60 °C con il tempo di idrolisi corretto. Infine, può essere trattato con acetocarmine. L'acetocarmine produce grandi aggregati di colorante in condizioni debolmente acide (pH 4-5). La dimostrazione della mitosi della radice di cipolla mediante colorazione con acetocarminio è mostrata in Figura 1.

Figura 1: mitosi della radice di cipolla

Tuttavia, l'acetocarmine è leggermente tossico rispetto agli altri coloranti di acido nucleico come l'aceto-orceina. È anche più economico di altri tipi di macchie.

Conclusione

Le colorazioni vengono utilizzate negli studi microscopici per migliorare il contrasto di specifici componenti biologici in un campione. L'acetocarmine è una macchia usata per colorare l'acido nucleico all'interno delle cellule. Poiché l'acetocarmine colora specificamente i cromosomi oltre al citoplasma, può essere utilizzato per visualizzare i cromosomi negli studi mitotici.

Riferimento:

1. "COLORAZIONE CON ACETOCARMINA". Kansas State University, disponibile qui. 2.J. A. Rattenbury (2009) Colorazione specifica della sostanza nucleare con aceto-carminio, tecnologia di colorazione, disponibile qui.

Cortesia dell'immagine:

1. "Mitosi della radice di cipolla" di staticd - Opera propria (CC BY-SA 3.0) attraverso Commons Wikimedia